Isolat Senyawa Aktif Mannotriose Alternatif Pengobatan Kanker Payudara

Tahap pertama dilakukan optimasi metode fermentasi dari bakteri Streptomyces sp. GMY01 untuk mengetahui metode terbaik untuk fermentasi dari bakteri tersebut menggunakan analisis kemometrik. Isolat Streptomyces sp. GMY01 selanjutnya difermentasi kembali dalam volume yang lebih besar menggunakan metode fermentasi terpilih berdasarkan hasil analisis kemometrik untuk mendapatkan ekstrak metanol yang cukup untuk keperluan isolasi.
 
Ekstrak metanol selanjutnya dilakukan frakasinasi dan isolasi menggunakan metode bioassay guided isolation untuk mendapatkan senyawa aktif antikanker payudara. Senyawa aktif selanjutnya ditentukan strukturnya menggunakan spektroskopi UV/Vis, Fourier transform-Infrared (FTIR), liquid chromatography-mass spectroscopy (LC-MS), 1H-NMR dan 13C-NMR.
 
Tahap selanjutnya, dilakukan pengkajian mekanisme aksi secara molekuler dari senyawa aktif hasil isolasi. Uji in vitro dilakukan dengan metode flowcytometry untuk melihat perubahan siklus sel akibat perlakuan senyawa isolat, dan metode imunositokimia untuk melihat adanya modulasi ekspresi beberapa protein target pada sel MCF-7 akibat perlakuan senyawa uji. 

Baca: Peneliti UNAIR Ciptakan Teknologi Pendeteksi Kanker dan Diabetes
 
Secara in silico, dilakukan analisis molecular docking menggunakan software Autodock Vina antara isolat senyawa aktif terhadap beberapa protein target untuk mengonfirmasi hasil dari uji in vitro.
 
"Hasil penelitian terkait optimasi metode kultur berdasarkan analisis kemometrik diketahui bahwa metode kultur menggunakan media Starch Nitrate Broth (SNB), wadah erlenmeyer biasa dan waktu kultur selama 5 hari menunjukkan hasil dan aktivitas sitotoksik yang terbaik dibandingkan dengan metode kultur yang lain," ungkapnya.
 
Hasil isolasi senyawa aktif pada ekstrak metanol bakteri Streptomyces sp. GMY01 diketahui bahwa senyawa aktif antikanker pada ekstrak tersebut berupa senyawa mannotriose. Isolat senyawa mannotriose mempunyai nilai IC50 sebesar 5,6 ug/ml pada sel kanker MCF-7 dan IC50 sebesar 687 ug/ml pada sel normal Vero.